ПАРТНЕРЫ

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛИСТИРОЛОВЫХ ЛАТЕКСОВ В КАЧЕСТВЕ ИММУНОСОРБЕНТОВ ДЛЯ КОНСРУИРОВАНИЯ ПРОТИВОБРУЦЕЛЛЕЗНЫХ ДИАГНОСТИКУМОВ

Плотникова Э.М., Салмаков К.М., Низамов Р.Н. ВНИВИ, г. Казань

Повышение чувствительности существующих диагностикумов, используемых при исследованиях на бруцеллез, является актуальной задачей ветеринарной иммунологии, поскольку существующие методы серологической диагностики зооантропоноза не удовлетворяют требованиям современной иммунодиагностики, т. к. одни из них являются многокомпонентными и дефицитными, другие - нестабильны и опасны в практическом применении (радиоиммунные диагностикумы).

Поэтому поиск альтернативных методов, обладающих высокой чувствительностью, простотой в обращении и доступностью, является весьма актуальным. В этом аспекте в последнее время имеется ряд сообщений о перспективности новых тест-систем на основе полистирольных носителей иммуносорбентов - полистирольных латексов, которые используются в тесте латекс - агглютинации.

Учитывая вышеизложенное, нами были проведены исследования по разработке технологии изготовления бруцеллезного латекс - диагностикума для индикации бруцеллезного антигена.

Для приготовления диагностикумов равные части раствора латексных частиц и оптимальные разведения гамма - глобулиновой фракции гипериммунизированных кроличьих - S-бруцеллезных сывороток с титром в РА 600-1600 ME перемешивали и выдерживали 2 ч в водяной бане при 37°С. Затем добавляли две части глицин - забуференного физиологического раствора NaCI (глицин - 7,3; NaCI - 10,02, дистиллированная вода рН - 8,2 - 1000мл) с 0,1%-ным бычьим альбумином и выдерживали в течение 5 дней при 40С, прозрачный су-пернатант удаляли, осадок ресуспендировали добавлением к диагностикуму 0,001% - мертиолята.

Полученный диагностикум испытывали в реакции латекс-агглютинации (РЛА) согласно общепринятой методике, оценку активности препарата проводили по 4 бальной системе. В качестве положительного антигена использовали стандартный бруцеллезный и полученный нами гамма облучением бруцеллезный антиген, а в качестве отрицательных контролей - сальмонеллезный и туляремийный антигены.

Чувствительность, активность и специфичность полученного диагностикума испытывали в РЛА с использованием различных штаммов бруцелл и гетерологичных культур (сальмонеллы, туляремийные антигены). Результаты испытаний показали, что полученный по новой технологии тест является активным, специфичным и по скорости получения ответа значительно превосходит существующие тесты.

ПРЕПАРАТЫ

ПАРТНЕРЫ

Документы